如何进行抗体分离纯化？

如何进行抗体分离纯化？

抗体分离和纯化的主要目的是将抗体与工艺相关的杂质和产品相关的杂质分离，最终获得高纯度，低潜在危害的抗体药物。
在纯化过程中需要去除的与过程相关的杂质包括细胞，细胞碎片，宿主细胞蛋白，宿主细胞核酸以及培养基和饲料溶液成分。需要去除的与产品相关的杂质主要包括抗体片段和聚集体。纯化过程还需要具有足够的病毒灭活和去除能力，以去除宿主细胞本身表达的内源性病毒样颗粒和及时发现的外源性病毒。
大多数过程使用ProteinA捕获抗体，并且至少一个离子交换色谱被用作纯化步骤，只有少数过程使用疏水，羟基磷灰石和分子筛色谱步骤。
首先将反应器的收获溶液离心并过滤以除去细胞和细胞碎片，然后通过ProteinA色谱法捕获抗体。将捕获的抗体在低pH下孵育后，通过两次离子交换色谱法纯化，然后通过病毒过滤。最后，改变溶液并调节抗体浓度以获得抗体储备溶液。
该过程中的低pH孵育和病毒过滤是两个正交的排他性病毒去除和灭活步骤。这两个排他步骤以及色谱步骤可以大大减少储备溶液中可能存在的病毒数量。