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超滤离心管是一种实验室常用的分离和纯化生物样品的器具,以其快速超滤功能脱颖而出。它能够达到高浓缩倍数,轻松从稀释或复杂的混合样本中回收目的产物。超滤离心管主要用于生物样品(如蛋白质、核酸、病毒等)的浓缩、脱盐和分离。它通过离心力驱动样品通过超滤膜,根据分子量大小实现分离。

如何选择及使用超滤离心管大部分客户有这样的困扰。许多客户对超滤离心管知之甚少,但却经常使用透析袋,经过了解后发现,超滤离心管往往能在短短几十分钟内完成透析袋一整天的任务。




使用方法




选择合适规格通常选择比目标分子量小2-6倍的膜孔径。认真阅读使用说明书,注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同。

预处理新购的超滤离心管的超滤膜含有微量甘油,使用前需要用纯水或缓冲液浸泡并置于冰箱预冷10分钟。之后倒出纯水,再将超滤管置于冰上预冷2-5分钟。如果干扰仍然存在可用0.1M NaOH清洗再用水清洗并甩干。注意超滤离心管中的滤膜一旦润湿后应避免变干。如果在预清洗后不是立即使用,则让液体保留在滤膜上,直到使用

加样如超滤管中有少许残留水,可将超滤管内管倒置1000×g离心1分钟,移液枪移取适量样本加入超滤管中。在加入样品时,需注意不得超过超滤管滤芯的最大体积。

平衡:质量和重心二者都要达到平衡必须确保配对的超滤管质量与重心平衡,且滤芯的放置位置和方向必须一致,以确保各平行样品浓缩倍数的一致性。

离心配平后,5000×g离心15-40分钟具体时间取决于所使用超滤管的MWCO。注意转速和加速度不可太快,否则直接损坏超滤膜。

图片源自网络

样本收集离心后,大分子留在上层,小分子和溶剂通过膜进入下层。外管滤液为小分子物质和溶剂;内管液体为大分子物质如需收集大分子物质,则另取外管,内管倒置1000×g离心1-2分钟。

清洗:若一次性使用,直接丢弃即可。若需重复使用,使用完的超滤管用纯水反复清洗5次,0.1M NaOH浸泡1-2小时,随后用20%乙醇清洗,并用超纯水或缓冲液清洗3一般不建议重复使用超滤管超过5次。

短时间保存0.1M NaOH浸泡1-2小时,纯水清洗3,然后用75%乙醇浸泡,务必使滤膜保持湿润,不能长菌。

长时间保存0.1M NaOH浸泡1-2小时,纯水清洗3,然后用20%乙醇浸泡,务必使滤膜保持湿润,不能长菌。

除盐或渗滤操作:

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注意事项




1. 避免膜堵塞样品需预处理去除颗粒物。

2. 定期检查浓缩进度防止样品过度浓缩,影响收率。

3. 超滤管最大离心力不能超过8000×g否则会导致滤膜破损或样品损失

4. 超滤样本会损失十分之一至五分之一的样本量,主要取决于样本中蛋白含量。

5. 若管底有可见的蛋白沉淀,可以先加入纯水,然后用枪头吹打,注意不要碰到膜,吹打至沉淀悬起,然后倒掉,不可用自来水猛冲。

6. 防止污染操作时保持无菌,避免样品污染




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九龄科技是一家专注于生物制药下游澄清、分离、纯化的生产型国家高新技术企业;产品广泛用于单抗、疫苗、诊断、血液制品、血清、内毒素等生物制品的过滤过程;九龄科技有“平板膜包与切向流过滤装置”、“中空纤维柱”、“除病毒过滤器”、“深层膜堆”、“除菌过滤器”、“超滤离心管”等产品,并拥有众多产品生产线,从小型一次性实验室过滤到生产型过滤系统,完全满足试验与生产的各项需求。九龄科技期待与您的合作!